1.模型制作再生障礙性貧血是由于生物、化學、物理等因素導致造血組織功能減退或衰竭而引起全血細胞減少,臨床表現(xiàn)為貧血、出血、感染等癥狀的一組綜合征,是造血系統(tǒng)比較常見的疾病。再障的動物模型主要有以下幾種:射線照射模型、藥物損傷模型、復合因素損傷模型、免疫介導損傷模型等。下面以放射損傷模型為例介紹模型的機制:高能輻射粒子作用于動物后,可引起電離,它可直接破壞機體內某些成分,也可以通過電離機體內的水分子產生具有活性的“自由基”,通過“自由基”作用于機體的其他成分。復制該模型主要通過Co-射線損傷骨髓造血干細胞及各系統(tǒng)幼稚細胞,直接損傷細胞DNA,殺傷外周血細胞建立小鼠再生障礙性貧血模型。模型制作方法:常選用BALB/c小鼠,8-12周齡,隨機分組,小鼠固定在有機玻璃照射盒內,并把裝有照射動物的照射盒固定于照射架上,計算照射距離、照射時間、劑量。為使動物兩側照射的劑量均勻,照射一半時間時,把動物連同照射架在原照射位置翻轉進行另一側的照射,總劑量為2.0Gy。造血干細胞存儲
2.模型評價指標紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)血小板(Pt)計數(shù)、血紅蛋白含量測定(Hb)網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、骨髓有核細胞計數(shù)。造血干細胞存儲
3.評判標準骨髓增生明顯低下,粒系祖細胞、紅系祖細胞和巨核系祖細胞計數(shù)顯著下降,非造血細胞比例增高,外周血三系減少(RBC、WBC、Pt)。
4. hUCMSC治療再生障礙性貧血的療效評價利用放射線照射導致的再生障礙性貧血與臨床上常見的再生障礙性貧血有一定相似性,均體現(xiàn)在造血功能障礙,血液細胞減少,血紅蛋白含量降低,血小板減少,但在發(fā)病機制上可能存在一些差異,因為臨床上常見的再生障礙性貧血用免疫抑制劑治療有一定效果,說明可能與自身免疫有一定關系。 hUCMSO治療放射線照射引起的再生障礙性貧血可能產生一定療效,表現(xiàn)為促進造血功能,使血細胞的數(shù)量增加,血紅蛋白含量提高,但造血功能的恢復程度與造血損傷程度有關,對于嚴重的造血功能障礙, hUCMSC治療也不是一種徹底的解決方案,因此療效判定應根據(jù)貧血程度綜合考慮。關鍵指標:血液細胞學[紅細胞(RBC)白細胞(WBC)]骨髓有核細胞數(shù)、血紅蛋白含量(Hb)次要指標:血小板(P1)計數(shù)、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、造血因子含量、臨床表現(xiàn)等。給再生障礙性貧血的動物模型輸入 hUCMSC之后,可根據(jù)上述指標的變化情況作出判斷,檢測指標的變化對療效判定起決定性作用,但延緩或控制疾病的發(fā)展也應該認為是一種療效。造血干細胞存儲