1.模型制作急性心肌梗死是由于冠狀動脈粥樣硬化伴粥樣斑塊出血、血栓形成,或冠狀動脈痙攣導致管腔急性閉塞、血流中斷,局部心肌缺血、壞死。一般來說可分為左冠狀動脈阻塞、左回旋支阻塞和右冠狀動脈阻塞。制作心肌梗死動物模型的方法有結扎法、微柱堵塞法、汞堵塞法、氣囊堵塞法、藥物法和血栓形成法。下面以大鼠為例采取結扎法作介紹:選用體重200g左右的 Wistar或SD大鼠,乙醚麻醉下開胸,剪開心包,暴露心臟,用縫線按照可見的界標穿過冠狀動脈下,根據造成梗死范圍大小,選擇結扎相應的冠狀動脈。需要大面積梗死可以結扎左支或右支冠狀動脈的起始部位,需要小面積梗死則選擇在左降支的中或上1/3與中13之間結扎。造血干細胞存儲
2.模型評價心肌梗死區域顏色、收縮功能檢測,心電圖S-T段、Q波的變化以及血清谷草轉氨酶、磷酸肌酸激酶的變化。評判標準:①大體標本:心肌梗死區域呈現紫色、膨突,左室前壁變薄坍陷,切開心臟后可見到心室壁梗死部位纖維增生;②心功能:反映心肌收縮功能的血流動力學(+ dp/dimas)和超聲心電圖檢測(FS)數值均減少,表示收縮力降低或消失;③心電圖:S-T段抬高、Q波出現加深、倒置;④血液生化:血清谷草轉氨酶、磷酸肌酸激酶升高的變化;⑤組織病理切片:HE染色:可見梗死部位心室壁明顯變薄,肌纖維被疏松結締組織取代,心內膜下梗死區淡染;殘存肌細胞增生,成纖維細胞增生,可見血管增生充血明顯; Masson染色:顯示心肌梗死區域殘存心肌之間纖維瘢痕形成,呈交錯分布。造血干細胞存儲
3. hUCMSC治療心肌梗死的療效評價對于心肌梗死的 hUCMSC治療,通常采用靜脈輸入法,對于大動物模型和臨床治療可采用冠狀動脈血管介入法,直接將 hUCMSC治療輸入支配心肌組織血液供應的血管內,這種方法可大大減少 hUCMSC進入心肌組織的路程增加 hUCMSC進入心肌的概率,而對于小動物模型,一般只能采用外周血管注射法。 hUCMSC的注射劑量可參照臨床劑量,設置臨床治療相同和高于臨床治療量的多個劑量,一般為1×10-5×10°細胞/g,可反復多次,但一次治療也有效。造血干細胞存儲
4.疔效判定 hUCMSO治療心肌梗死的療效評價關鍵指標:組織病理學、心功能評價血流動力學( dp/dtmax)。次要指標:心電圖(S-T段、Q波)心肌酶學(CK)及臨床表現等。 hUCMSC治療后一般會出現心排出量增加、心臟酶學功能改善,組織結構分析可見有部分 hUCMSC分布于梗死的心肌組織之中,心肌細胞壞死、凋亡比例遠低于未接受 hUCMSC治療的對照組,長期觀察可見心肌纖維化減少。