排除 UCMSC攜帶病原微生物的重點環(huán)節(jié)是對產(chǎn)婦進(jìn)行產(chǎn)前健康體檢，干細(xì)胞存儲排除攜帶某些特定病原微生物的可能，同時還要注意排除病原微生物潛伏期感染的可能，一般應(yīng)在第1次檢測后2個月再次復(fù)檢。在 UCMSC于體外培養(yǎng)過程中和入庫前，可以對培養(yǎng)上清或細(xì)胞裂解產(chǎn)物進(jìn)行病原微生物檢測，盡可能排除細(xì)胞產(chǎn)品攜帶病原微生物的可能。檢測病原微生物的種類和方法是排除 UCMSC攜帶病原微生物中值得研究的問題，在排除病原微生物種類上應(yīng)考慮臨床常見的具有傳染性的重要病原微生物，如乙型肝炎病毒、艾滋病病毒等，在檢測方法上應(yīng)選擇靈敏度高、重復(fù)性和穩(wěn)定性好、簡便易行的標(biāo)準(zhǔn)化方法。未來的發(fā)展方向是采用生物芯片(基因芯片和蛋白芯片)，可以實現(xiàn)高通量檢測，一次性排除成千上萬種病原微生物。在實際操作中，為保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)采用多種方法同時進(jìn)行，同時選擇權(quán)威機(jī)構(gòu)和多家實驗室進(jìn)行檢測，結(jié)果一致說明準(zhǔn)確可靠。

從實際情況來看，能夠在體外培養(yǎng)條件下穩(wěn)定生長的細(xì)胞一般不會攜帶細(xì)菌類病原生物，因為一旦有細(xì)菌污染，培養(yǎng)體系的性質(zhì)會很快發(fā)生改變而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。因此，干細(xì)胞存儲體外分離和傳代培養(yǎng)出來的 UCMSC應(yīng)該不會有攜帶細(xì)菌的可能。體外傳代培養(yǎng)的細(xì)胞如果有真菌類病原污染，一般肉眼可見，細(xì)胞也難以穩(wěn)定生長，排除方法相對簡單。

關(guān)于支原體和衣原體污染問題，由于其比細(xì)菌和真菌類更微小，雖然在短時間內(nèi)不會出現(xiàn)培養(yǎng)液混濁、顏色變化、絮狀物等，肉眼可能難以鑒別，但污染了這類病原微生物的細(xì)胞隨著培養(yǎng)時間的延長，培養(yǎng)體系中會岀現(xiàn)泥沙樣沉積物，細(xì)胞變性、壞死、漂浮，難以在體外穩(wěn)定生長。因此，大多數(shù)細(xì)菌、真菌、支原體類病原體可以從 UCMSC在體外培養(yǎng)條件下的生長特性、細(xì)胞形態(tài)、活性狀態(tài)等方面進(jìn)行判定和排除。在 UCMSC質(zhì)量控制體系中，需要通過檢測分析和鑒別排除的病原微生物重點是病毒類，因其屬于微觀粒子，可能在細(xì)胞內(nèi)生長，肉眼和普通光學(xué)顯微鏡下難以觀察到，干細(xì)胞存儲只有利用電子顯微鏡觀察、基因擴(kuò)增、免疫學(xué)檢測等方法才能分辨出來。排除UCMSC中的病毒，常用的方法是用標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行特異性抗原抗體反應(yīng)，通過標(biāo)記物分析判定樣本中是否含有病毒抗原或抗體，具體包括酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELSA)放射免疫測定法(RA入免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)(ICS)等。

病毒DNA檢測也常用于血液樣本和培養(yǎng)物中特定病毒的檢測，其方法主要有：①設(shè)計病毒特定基因引物，采用酶聯(lián)聚合反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增凝膠成像觀察；②用標(biāo)記的DNA分子作探針，通過DNA分子雜交方法，鑒定樣本中的特征性遺傳信息；③基因芯片檢測：該方法是根據(jù)基因探針雜交的原理，將病毒特異性核酸探針固定于基片上，通過核酸雜交反應(yīng)后確定標(biāo)記物的顏色強(qiáng)度判定樣本是否含有特定病毒和病毒載量；④蛋白芯片檢測：利用抗原抗體反應(yīng)的原理，將標(biāo)記抗原或抗體固定于基片上，通過與樣品進(jìn)行反應(yīng)后，通過觀察標(biāo)記物的顏色強(qiáng)度判定樣本是否含有特定病毒和病毒載量。利用免疫電鏡技術(shù)可以對細(xì)胞內(nèi)病毒進(jìn)顯色、定位和判定病毒載量，該技術(shù)是將免疫化學(xué)技術(shù)與電鏡技術(shù)相結(jié)合，在超微結(jié)構(gòu)水平觀察抗原、抗體結(jié)合定位，主要有免疫膠體金技術(shù)、免疫酶標(biāo)技術(shù)、免疫鐵蛋白技術(shù)等。

排除體外制備的 UCMSO的病原，主要參考臨床輸血的病原檢測方法和標(biāo)準(zhǔn)，重點檢測病原體包括：艾滋病病毒(HV)、乙型肝炎病毒(HBV)丙型肝炎(HCV)鼻炎癌病毒(EBV)巨細(xì)胞病毒(CMV)及梅毒螺旋體( treponemapallidum)等。為排除攜帶病毒的潛伏期，應(yīng)在產(chǎn)前、產(chǎn)后60天分別采集妊娠婦女外周血進(jìn)行上述病原檢測，如果產(chǎn)后60天采血難以實現(xiàn)，也可在產(chǎn)前增加采血量，留取部分樣本置于4℃條件下放置60天后檢測。UCMC人庫前可再次復(fù)檢，干細(xì)胞存儲方法是采用超聲破碎法或反復(fù)凍融法破碎細(xì)胞，離心獲取上清液，采用DNA測定法或 ELISA法檢測上清液中是否含有病原體抗原。