1.設備超凈工作臺、倒置照相顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡、解剖顯微鏡、共聚焦顯微鏡、電子顯微鏡、CO2培養箱、低速大容量多管離心機、普通冰箱、超低溫冰箱、程序降溫系統、制冰機、酶標儀、染色體分析系統、細胞計數儀、PCR儀、基因測序系統、凝膠成像系統、超濾系統、西安臍帶干細胞存儲純水系統、PH計、電子稱、平衡稱或天平、高速離心機、高壓蒸氣消毒裝置、點熱干燥箱、恒溫水浴箱、微孔過濾器、移液器(1~1000u)。
2.消耗材料T175塑料培養瓶、T75塑料培養瓶、T25培養瓶、培養皿、塑料離心管(5ml、1oml、2oml、5oml、l0m、250ml)、EP管、細胞凍存管、一次性移液管、移液器槍頭、乳膠手套、吸球、酒精燈、小型手術包(剪刀、鑷子、眼科剪、眼科鑷、止血鉗、刀片等)、紗布、棉球、搪磁盤、雜物缸等。進入細胞工程實驗室的所有耗材必須是無菌的合格產品。
3.基本主要試劑DMEM/F12培養基、西安臍帶干細胞存儲EDTA-025%胰酶、 NaHCo3、胎牛血清(FBs)青霉素(80萬U)鏈霉素(00萬U)表皮細胞生長因子、堿性成纖維細胞生長因子、干細胞生長因子、去離子無菌水、生理鹽水、人血白蛋白、復方電解質凍存液、酒精、消毒液、pH試紙。進入細胞工程實驗室的所有耗材必須是無菌的合格產品。
基礎試劑的準備:
(1)66% NaHCO3溶液的配制:用電子天平稱取 NaHco366,。加滅菌注射用水定容至100m,在細胞層流室內超凈工作臺上用高壓滅菌過的0.22um的濾膜過濾除菌后備用。
(2)10%FBS的DMEM-F12培養液的配制:無菌條件下在500基礎DMEM-F12培養液中加入5m胎牛血清,再用66% NaHCo2溶液調節pH值至74后備用。
(3)抗生素的配置:將青霉素(80萬U/瓶)溶解于4ml滅菌注射用水中,西安臍帶干細胞存儲鏈霉素(100萬U瓶)溶解于4ml滅菌注射用水中,兩者混勻后按照1m/支分裝備用,使用時每升培養液加入1ml。
(4)凍存液:含20%FBS和含10%DMSO的完全DMEM-F12培養液。