MSC-exo的懸浮密度為1.10-1.18gm,其膜表面富含膽固醇、鞘磷脂和神經(jīng)酰胺脂筏脂質(zhì)及信號蛋白,外泌體內(nèi)含有多種蛋白質(zhì)和RNA。這些生物活性物質(zhì)的種類和數(shù)量并不是始終相同,西安牙髓干細(xì)胞公司而是隨著細(xì)胞的生理狀態(tài)的變化而改變。
MSC=exo包含大多數(shù)外泌體共同表達(dá)的物質(zhì),西安牙髓干細(xì)胞公司包括跨膜蛋白和融合蛋白(GTP酶、膜聯(lián)蛋白、浮艦蛋白)4次跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81、CD82)多泡體生成相關(guān)蛋白(AxTsSG101)、脂質(zhì)相關(guān)蛋白和磷脂酶。除此之外,MSC-ex還含有MSC表達(dá)的黏附分子,包括CD29、CD44和CD73等。目前發(fā)現(xiàn),MSC-exo一共含有857種蛋白質(zhì),但并非全部同時表達(dá)。在3組獨立實驗中,通過高精度質(zhì)譜分析,檢測到MSC-exo分別含有379、432、420種蛋白質(zhì),其中只有154種蛋白質(zhì)共同表達(dá)。
而本課題組通過超高速離心法分離MSC-exo外泌體和PEG沉淀法分離MSC=exo,并用高精度質(zhì)譜檢測,分別檢出169和102種蛋白質(zhì)。可見MC-exo所含蛋白質(zhì)的種類和豐度受到多種因素的影響,包括外泌體的分離方法、外泌體的保存手段、外泌體蛋白的檢測方法細(xì)胞的生理生化狀態(tài)等。因此,MSC=exo蛋白質(zhì)的種類和豐度仍需進一步研究和分類。西安牙髓干細(xì)胞公司但就目前研究資料可知,MSC-exo所含蛋白質(zhì)充分代表了32種生物過程,包括外泌體生成和免疫。在這些蛋白質(zhì)中,與治療作用相關(guān)的( PDGFRB、EGFR、 PLAUR)信號分子(RRAS/NRAS、MAPK1、GNA13/可能包括表面受體GNA12、CDC42和VAV2)黏附分子(FN1、EZR、 IQGAP1、CD47、整合素、 LGALSI/LGALS3)和MSC相關(guān)表面抗原。其中,蛋白酶體20S核心顆粒的7條a和7條β鏈MSC-exo都有表達(dá),且免疫蛋白酶體中的3個亞基表達(dá)水平較高,提示MSC-exo損傷修復(fù)功能可能與此有關(guān)。
MSC-exo含有的RNA大多是核酸數(shù)目小于300的小RNA( small rna),其中包括microrNA(簡稱 mirNA)。通過微陣列雜交技術(shù)對比MSC和MSC-exo中的 mirNA發(fā)現(xiàn),在166種mRNA中有15種只存在于MsC-exo中,106種只存在于MSC中,33種在兩者中都表達(dá),而有12種mRNA在MSC=exo的表達(dá)是MC的2倍。MC-o0不含28和18s核糖體,但含有其降解產(chǎn)物mRNA923西安牙髓干細(xì)胞公司。
MSC-exo中 miRNA主要以前體(pre- mirNA)的形式存在,與MSC細(xì)胞相比,其pre- mirNA/ mirNA比率更高,能被RNaeⅢ剪切成成熟的mirNA。這些數(shù)據(jù)提示我們,MSC-exo并非隨機而是選擇性的包裹MSC細(xì)胞內(nèi)的小RNA,包括 mirNA、非編碼RNA或者RNA降解的中間產(chǎn)物,而不傾向于包裹完整的mRNA或者核糖體RNA西安牙髓干細(xì)胞公司。
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