侯馬臍帶干細(xì)胞存儲機(jī)構(gòu)
發(fā)布時(shí)間：2022-05-23 01:35:31
侯馬臍帶干細(xì)胞存儲機(jī)構(gòu)
不同的是， Thompson實(shí)驗(yàn)室是慢病毒載體引入Oct4、Sox2、 Nanog和LⅠN28基因，而 Shinya Yamanaka依然是利用反轉(zhuǎn)錄病毒引入Oc4、Sox2、Kl4和c-Myc4種轉(zhuǎn)錄因子基因組合。隨后世界各地不同科學(xué)家在獼猴、大鼠、豬等動物上取得成功。還發(fā)現(xiàn)其他方法同樣也可以制造這種細(xì)胞。2013年，北京大學(xué)鄧宏魁等利用小分子化合物與體細(xì)胞共培養(yǎng)，成功誘導(dǎo)體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為ES細(xì)胞樣細(xì)胞并將其命名為化學(xué)誘導(dǎo)的多潛能干細(xì)胞(CIPS)。其他還有利用卵細(xì)胞、ES細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞提取物與成體細(xì)胞共培養(yǎng)，
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保證在無菌環(huán)境中操作，減少操作過程對細(xì)胞的影響和避免操作污染。為避免攜帶病原處于潛伏期難以檢測到的問題，好在潛伏期后、完成細(xì)胞制備(入庫前)等環(huán)節(jié)釆取多種方法重復(fù)檢測，以確保排除傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)。長期傳代擴(kuò)增需要在培養(yǎng)體系中添加維持“干”性的和促進(jìn)生長的細(xì)胞因子，如SCF、bFCF等，以維護(hù)其活性。選擇合適的細(xì)胞保存液對維持間充質(zhì)干細(xì)胞的活性也極為重要，研發(fā)更有效的間充質(zhì)干細(xì)胞凍存劑仍然是間充質(zhì)干細(xì)胞庫及相關(guān)工作者的重要課題，一些細(xì)胞庫在現(xiàn)有凍存劑的基礎(chǔ)添加DMSO、白蛋白和細(xì)胞因子等對保持間充質(zhì)干細(xì)胞的活性有一定幫助。
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后來，科學(xué)家采用體細(xì)胞核移植技術(shù)，從成體細(xì)胞注射到卵母細(xì)胞后發(fā)育而成的囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中也獲得了人和動物的ES細(xì)胞。2007年，山中申彌( Shinya yamanaka)實(shí)驗(yàn)室和湯姆森( Thompson)實(shí)驗(yàn)室?guī)缀跬瑫r(shí)報(bào)道，利用病毒載體將四個(gè)轉(zhuǎn)錄因子(0ct4、Sox2、Kl4和c-Mye)組合轉(zhuǎn)入體細(xì)胞中，成功重編程而得到類似ES細(xì)胞的誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞( induced pluipotent stem cells，PS細(xì)胞)。2013年，北京大學(xué)鄧宏魁等利用小分子化合物與體細(xì)胞共培養(yǎng)，成功誘導(dǎo)體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為ES細(xì)胞樣細(xì)胞并將其命名為化學(xué)誘導(dǎo)的多潛能干細(xì)胞(CIPS)人和多種動物ES細(xì)胞系的建立及不同方法獲取ES樣細(xì)胞技術(shù)的發(fā)展為ES細(xì)胞的建立奠定了基礎(chǔ)。
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臍血庫分為“公共庫”和“自體庫”。“公共庫”接受捐贈、免費(fèi)保存；自體臍血保存需要支付費(fèi)用，主要供自己或親屬使用。世界臍血庫于1995年在美國建立，現(xiàn)已遍布世界各地區(qū)，其中美國有近百家自體和公共臍血庫。歐洲擁有世界多的臍血庫，包括50個(gè)公共庫和104個(gè)自體庫，占世界總量的40%。我國臺灣地區(qū)是臍血庫高度密集的地區(qū)，擁有10個(gè)臍血庫，國內(nèi)臍血庫建設(shè)在近幾年發(fā)展迅速，獲得國家政府批準(zhǔn)的臍血庫有10個(gè)，遍布全國各地的臍血庫有近百個(gè)。國內(nèi)臍血庫的特點(diǎn)是公共庫與自體庫同時(shí)運(yùn)行，儲存干細(xì)胞類型多元化，
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不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)制備和儲存方法上大同小異，均需要將富含間充質(zhì)干細(xì)胞的組織進(jìn)行機(jī)械或酶消化分散，將分散細(xì)胞或微組織塊進(jìn)行貼壁培養(yǎng)、純化和擴(kuò)增，經(jīng)檢驗(yàn)鑒定后，將合格的間充質(zhì)干細(xì)胞置于低溫環(huán)境(-196℃)中保存。間充質(zhì)干細(xì)胞在體外分離、純化、擴(kuò)增相對容易，利用其貼壁生長特性進(jìn)行分散細(xì)胞或組織貼壁培養(yǎng)即可獲得，而且傳代培養(yǎng)生長更快。例如，一條50cm長的臍帶一般可獲得原代細(xì)胞30×10~50×10個(gè)間充質(zhì)干細(xì)胞，傳帶培養(yǎng)至第5代左右可獲得1×10個(gè)以上數(shù)量的間充質(zhì)干細(xì)胞，可滿足千人次臨床治療。
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5.妊娠婦女的要求臍帶的采集應(yīng)取得臍帶所有人的知情同意和授權(quán)，并經(jīng)倫理委員會批準(zhǔn)，臍帶來自足月剖宮產(chǎn)健康妊娠婦女。采集前應(yīng)對供者進(jìn)行HAV、HBV、HCV、HEV、HIV、TPA、EBV、CMV、ALT、支原體等檢測(表7-1)，只有全部合格方能作為采集對象。作為細(xì)胞制備信息中的重要內(nèi)容之一，需提供干細(xì)胞的獲取方式和途徑以及相關(guān)的臨床資料，包括供者的一般信息、既往病史、家族史等。既往史和家族史要對遺傳病(單基因和多基因疾病，